
行业新闻
通用的将HPLC 要领转换为UPLC 要领有以下三个办法:
选择与药典要领指定色谱柱相当的HPLC色谱柱,,,,并运行药典中详细品种的各论要领
使用要领转换公式将HPLC要领转换为UPLC要领
凭证药典要求,,,,对转化后的UPLC要领举行评价
HPLC色谱柱选择
选择等效的色谱柱成为转换的主要条件,,,,这也是要领转换的难点之一。。。。。。《中国药典》并未对色谱柱做出详细指示,,,,为了准确选择与药典各论中指定的色谱柱类型性能相当的色谱柱,,,,若是药典各论要领中没有划定色谱柱的详细品牌和规格,,,,一样平常需要举行色谱柱的筛选实验,,,,以便选出一款切合药典要领要求的色谱柱,,,,通常情形下,,,,这是一个较量耗时的事情。。。。。。
HPLC/UPLC要领转换
针对两者的差别举行转换研究:色谱柱填料粒径差别、系统体积差别、仪器运送流动相系统内径差别,,,,将会影响到流速、进样量、梯度洗脱程序,,,,因此需要对这三个参数举行调解。。。。。。
1. 流速的改变
流速主要是指流动相在色谱柱中的线速率,,,,与色谱柱内径dc有关,,,,流速的盘算公式为:
目的流速=(原要领流速*目的柱内径²*原粒径)/原色谱柱内径²/现粒径
流速的调解需要注重不改变线速率
2. 进样量的改变
由于UPLC上使用的色谱柱柱体积一样平常比通俗HPLC上小许多,,,,以是载样量也会有所降低,,,,若是这时不减小进样量,,,,有可能造成样品过载或溶剂效应。。。。。。而进样量与柱体积成正相关。。。。。。
目的进样体积=原要领进样体积*目的柱体积/原色谱柱体积
进样量的改变需要注重不改变供试液的浓度
3. 梯度洗脱程序转换
梯度洗脱需调解梯度洗脱程序。。。。。。
通常色谱仪器均配备转换软件,,,,输入原始洗脱程序,,,,软件可自动盘算并转换为目的仪器的洗脱程序。。。。。。
虽然,,,,UPLC/HPLC的转换尚有着更多的神秘,,,,差别的变量都对要领转移有着差别水平的影响,,,,为了越发深入的探讨,,,,药融圈联合沃特世配合约请到南京药石科技股份有限公司 CMC剖析部分析总监张明以及沃特世科技(上海)有限公司大中华区资深应用工程师楚朋飞,,,,在2023年3月27日药融云端直播间,,,,配合探讨剖析UPLC的使用战略,,,,希冀能在HPLC/UPLC要领转移时提供助力。。。。。。
