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提效增速 | UPLC与HPLC转换知几多
宣布日期:2023年04月18日 宣布人:admin
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  1. 通用的将HPLC 要领转换为UPLC 要领有以下三个办法:

    1. 选择与药典要领指定色谱柱相当的HPLC色谱柱,,, ,并运行药典中详细品种的各论要领

    2. 使用要领转换公式将HPLC要领转换为UPLC要领

    3. 凭证药典要求,,, ,对转化后的UPLC要领举行评价

     

    HPLC色谱柱选择

    选择等效的色谱柱成为转换的主要条件,,, ,这也是要领转换的难点之一 。。。。。。《中国药典》并未对色谱柱做出详细指示,,, ,为了准确选择与药典各论中指定的色谱柱类型性能相当的色谱柱,,, ,若是药典各论要领中没有划定色谱柱的详细品牌和规格,,, ,一样平常需要举行色谱柱的筛选实验,,, ,以便选出一款切合药典要领要求的色谱柱,,, ,通常情形下,,, ,这是一个较量耗时的事情 。。。。。。

    HPLC/UPLC要领转换

    针对两者的差别举行转换研究:色谱柱填料粒径差别、系统体积差别、仪器运送流动相系统内径差别,,, ,将会影响到流速、进样量、梯度洗脱程序,,, ,因此需要对这三个参数举行调解 。。。。。。

     

     1. 流速的改变 

    流速主要是指流动相在色谱柱中的线速率,,, ,与色谱柱内径dc有关,,, ,流速的盘算公式为:

    目的流速=(原要领流速*目的柱内径²*原粒径)/原色谱柱内径²/现粒径

    流速的调解需要注重不改变线速率

     

     2. 进样量的改变 

    由于UPLC上使用的色谱柱柱体积一样平常比通俗HPLC上小许多,,, ,以是载样量也会有所降低,,, ,若是这时不减小进样量,,, ,有可能造成样品过载或溶剂效应 。。。。。。而进样量与柱体积成正相关 。。。。。。

    目的进样体积=原要领进样体积*目的柱体积/原色谱柱体积

    进样量的改变需要注重不改变供试液的浓度

     

     3. 梯度洗脱程序转换 

    梯度洗脱需调解梯度洗脱程序 。。。。。。

    通常色谱仪器均配备转换软件,,, ,输入原始洗脱程序,,, ,软件可自动盘算并转换为目的仪器的洗脱程序 。。。。。。

     

    虽然,,, ,UPLC/HPLC的转换尚有着更多的神秘,,, ,差别的变量都对要领转移有着差别水平的影响,,, ,为了越发深入的探讨,,, ,药融圈联合沃特世配合约请到南京药石科技股份有限公司 CMC剖析部分析总监张明以及沃特世科技(上海)有限公司大中华区资深应用工程师楚朋飞,,, ,在2023年3月27日药融云端直播间,,, ,配合探讨剖析UPLC的使用战略,,, ,希冀能在HPLC/UPLC要领转移时提供助力 。。。。。。

    提效增速 | UPLC与HPLC转换知几多

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